 
| |
[ Вход | Регистрация ]
|
Апикальная меристема
Nym-nym, 02.05.2007 12:15
У кого есть методика выделения апикальной меристемы у подсолнечника для индукции каллуса с дальнейшей регенерации? Подскажите где преоьрести дикий штам агробактерии?
guest: Андрей , 06.05.2007 18:16
Nym-nym, с подсолнечником работать не приходилось. Но разве для каллусогенеза и дальнейшей регенерации нужна именно апикальная меристема? Или у подсолнечника можно получить регенеранты только через апекс, или Вам нужны именно мериклоны? Не совсем понятно. Какое направление вашей работы, агробактериальная трансформация?
Bear, 12.07.2007 16:30
(Nym-nym @ 02.05.2007 13:15)
У кого есть методика выделения апикальной меристемы у подсолнечника для индукции каллуса с дальнейшей регенерации? Подскажите где преоьрести дикий штам агробактерии? Действительнор, не совсем понятно. Nym-nym, что Вы хотите узнать?
Mice, 08.10.2007 13:05
Мы допустим выделяем апикальную меристему у картофеля, чтобы получать свободные от инфекции растения. Но если нужен просто каллус, то по аналогии с пшеницей и ячменем надо может с зародыша начать? И зачем вам дикий штам агробактерии? Он вроде не сильно для трансформации-то катит?
guest: Андрей , 12.10.2007 21:54
"И зачем вам дикий штам агробактерии? Он вроде не сильно для трансформации-то катит?"
Попытаюсь предположить. По плодовым есть работы по повышению засухоустойчивости растений, проводились по-моему во ВСТИСПе, в лаборатории В.А. Высоцкого. При этом происходит заражение биоткани диким штаммом Агробактериум. В результате у регенерантов развивается более мощная корневая система, что может быть косвенно связано с более активным функционированием ризогенной зоны. Боюсь ошибиться насчет результатов, но, в принципе, это может быть интересно. Ну и кроме того, для начинающих работать по агробактериальной трансформации - какой-то опыт.
Правда причем тут апексы - большой вопрос.
Попытаюсь предположить. По плодовым есть работы по повышению засухоустойчивости растений, проводились по-моему во ВСТИСПе, в лаборатории В.А. Высоцкого. При этом происходит заражение биоткани диким штаммом Агробактериум. В результате у регенерантов развивается более мощная корневая система, что может быть косвенно связано с более активным функционированием ризогенной зоны. Боюсь ошибиться насчет результатов, но, в принципе, это может быть интересно. Ну и кроме того, для начинающих работать по агробактериальной трансформации - какой-то опыт.
Правда причем тут апексы - большой вопрос.
Bear, 29.01.2008 19:39
Вышла статья:
Я.Б.Нескородов, Я.В.Мишуткина, А.К.Гапоненко, К.Г.Скрябин.
"Метод регенерации in vitro побегов подсолнечника (Helianthus annuus L.) из асептических семян как эксплантов для генетической трансформации"
Биотехнология, 2007, №6, с. 27-33
Я.Б.Нескородов, Я.В.Мишуткина, А.К.Гапоненко, К.Г.Скрябин.
"Метод регенерации in vitro побегов подсолнечника (Helianthus annuus L.) из асептических семян как эксплантов для генетической трансформации"
Биотехнология, 2007, №6, с. 27-33
Guest, 31.01.2008 15:45
Штаммы агробактерии:
Bear, 02.03.2009 17:19
Разработан эффективный способ стерилизации семян подсолнечника, позволяющий получать 100%-ный выход асептического материала для культивирования in vitro. Оптимизирован независимый от генотипа способ регенерации побегов из семян подсолнечника in vitro. Частота регенерации побегов составила от 83,5 до 90,3%- Разработанная методика получения in vitro побегов из асептических семян может быть использована для проведения работ по генетической трансформации подсолнечника.
 Biotechnology_2007.pdfразмер: 4.9 кол-во скачиваний: 244 |
Bear, 03.03.2009 18:33
Nym-nym, получилась ли у Вас трансформация?
Bear, 08.10.2009 13:21
Вышла статья:
Developing phosphinothricin-resistant transgenic sunflower (Helianthus annuus L.) plants.
Ya. B. Neskorodov, A. L. Rakitin, A. M. Kamionskaya, K. G. Skryabin
Abstract Most investigations on genetic transformations of sunflower have used the neomycin transferase (nptII) gene as the selectable marker. We previously reported a PPT-based selection system for sunflower transformation that uses the bialaphos resistance (bar) gene as the selectable marker and 20 mg/l of phosphinothricin (PPT) as the selective agent. Sunflower (Helianthus annuus L.) variety Skorospeliy 87 was genetically transformed via Agrobacterium tumefaciens strain EHA 105 harbouring the binary plasmid vector pBAR. Two-day-old explants from mature embryos competent for direct shooting were used. Southern blot and ELISA experiments confirmed the stability of expression in two generations of transgenic plants. Transformed plants transferred to soil in the greenhouse exhibited resistance to the herbicide Basta at 3 l/ha.
Developing phosphinothricin-resistant transgenic sunflower (Helianthus annuus L.) plants.
Ya. B. Neskorodov, A. L. Rakitin, A. M. Kamionskaya, K. G. Skryabin
Abstract Most investigations on genetic transformations of sunflower have used the neomycin transferase (nptII) gene as the selectable marker. We previously reported a PPT-based selection system for sunflower transformation that uses the bialaphos resistance (bar) gene as the selectable marker and 20 mg/l of phosphinothricin (PPT) as the selective agent. Sunflower (Helianthus annuus L.) variety Skorospeliy 87 was genetically transformed via Agrobacterium tumefaciens strain EHA 105 harbouring the binary plasmid vector pBAR. Two-day-old explants from mature embryos competent for direct shooting were used. Southern blot and ELISA experiments confirmed the stability of expression in two generations of transgenic plants. Transformed plants transferred to soil in the greenhouse exhibited resistance to the herbicide Basta at 3 l/ha.
|
PCTOC_2009.pdf размер: 364.23 кол-во скачиваний: 542 |
Bear, 09.12.2009 13:09
Новая статья по трансформации подсолнечника в Nature
Transient transformation of sunflower leaf discs via an Agrobacterium-mediated method: applications for gene expression and silencing studies
The sunflower belongs to the Compositae family and is an economically important crop because of the quality of its oil. Unfortunately, molecular analyses are limited due to the lack of genomic information, mutant libraries and efficient and rapid transformation protocols. In a wide variety of species, Agrobacterium-mediated transient transformation is a useful tool that can provide valuable insight into many biological processes. However, this technology has not been routinely applied to the sunflower because of difficulties with infiltration. Here, we present an optimized protocol for Agrobacterium–mediated transient transformation of leaf discs. Using this procedure, we were able to quickly overexpress or silence a given gene, enabling us to study several biochemical processes and characterize sunflower regulatory sequences. One of the major advantages of this approach is that in only 1 work-week it is possible to acquire considerable molecular information while avoiding the use of controversial heterologous systems. Transforming heterologous species is frequently unacceptable, as the conservation of molecular events in many cases is not well documented.
Nature Protocols 4, - 1699 - 1707 (2009)
Published online: 29 October 2009 | doi:10.1038/nprot.2009.178
Bear, 15.02.2010 14:41
Вышла статья:
"Влияние тиосульфата натрия и ультразвука на индукцию регенерации in vitro инбредных линий подсолнечника (Helianthus Annuus L.)"
А.Г. Комисаренко, С.И. Михальская, А.Э. Малина, Е.Н.Тищенко
ISSN 1810 7834. Вісн. Укр. тов ва генетиків і селекціонерів. 2009, том 7, № 1
Исследовали влияние тиосульфата натрия и ультразвука на реализацию морфогенетического потенциала инбредных линий подсолнечника. Показано, что
эти факторы оказывают позитивный эффект на индукцию регенерации, которая осуществляется путём прямого органогенеза из сегмента 3–4 дневных проростков. Установлена генотипическая зависимость частоты побегообра зования от концентрации тиосульфата натрия и продолжительности действия ультразвука. Комплексное применение тиосульфата натрия и ультразвука по вышало частоту регенерации инбредных линий 96А/3, 70А/3, 16А/3 в 1,88, 2,41 и 3,58 раза, соответственно.
"Влияние тиосульфата натрия и ультразвука на индукцию регенерации in vitro инбредных линий подсолнечника (Helianthus Annuus L.)"
А.Г. Комисаренко, С.И. Михальская, А.Э. Малина, Е.Н.Тищенко
ISSN 1810 7834. Вісн. Укр. тов ва генетиків і селекціонерів. 2009, том 7, № 1
Исследовали влияние тиосульфата натрия и ультразвука на реализацию морфогенетического потенциала инбредных линий подсолнечника. Показано, что
эти факторы оказывают позитивный эффект на индукцию регенерации, которая осуществляется путём прямого органогенеза из сегмента 3–4 дневных проростков. Установлена генотипическая зависимость частоты побегообра зования от концентрации тиосульфата натрия и продолжительности действия ультразвука. Комплексное применение тиосульфата натрия и ультразвука по вышало частоту регенерации инбредных линий 96А/3, 70А/3, 16А/3 в 1,88, 2,41 и 3,58 раза, соответственно.
|
2009_1.pdf размер: 2.29 кол-во скачиваний: 2 15.02.2010 — 01.03.2010 |
Bear, 28.06.2010 13:56
Вышла книга!
Series on: Genetics, Genomics and Breeding of Crop Plants
Genetics, Genomics and Breeding of Sunflower
Editors: Jinguo Hu: USDA-Agricultural Research Service, Washington State University, Pullman, WA, USA
Gerald Seiler: USDA, Northern Crop Science Laboratory, Fargo, ND, USA
C. Kole: Visiting Professor, Clemson University, Clemson, USA
ISBN 978-1-57808-676-4/ April 2010/ 342 pages including 6 color plates, hc/ US $ 129.95
About the Book
The sunflower has fascinated mankind for centuries. The oilseed sunflower contributes approximately 10% of the world’s plant-derived edible oil and the confection type sunflower holds a considerable share of the directly consumed snacks market. In addition, sunflower is also grown as an ornamental for cut flowers, as well as in home gardens. We are now embarking on the age of genomics which will expedite the process of genetic improvement of crops. There has been an explosion of information on genetic markers, DNA sequences, and genomic resources for most major food crops including sunflower. This volume is intended to bridge traditional research with modern molecular investigations on sunflower.
Series on: Genetics, Genomics and Breeding of Crop Plants
Genetics, Genomics and Breeding of Sunflower
Editors: Jinguo Hu: USDA-Agricultural Research Service, Washington State University, Pullman, WA, USA
Gerald Seiler: USDA, Northern Crop Science Laboratory, Fargo, ND, USA
C. Kole: Visiting Professor, Clemson University, Clemson, USA
ISBN 978-1-57808-676-4/ April 2010/ 342 pages including 6 color plates, hc/ US $ 129.95
About the Book
The sunflower has fascinated mankind for centuries. The oilseed sunflower contributes approximately 10% of the world’s plant-derived edible oil and the confection type sunflower holds a considerable share of the directly consumed snacks market. In addition, sunflower is also grown as an ornamental for cut flowers, as well as in home gardens. We are now embarking on the age of genomics which will expedite the process of genetic improvement of crops. There has been an explosion of information on genetic markers, DNA sequences, and genomic resources for most major food crops including sunflower. This volume is intended to bridge traditional research with modern molecular investigations on sunflower.
Bear, 22.12.2010 18:56
Вышла новая статья:
Agrobacterium-Mediated Transformation of Sunflower (Helianthus Annuus L.) using Direct Shoot Regeneration Protocol
Доступна для свободного скачивания:
Agrobacterium-Mediated Transformation of Sunflower (Helianthus Annuus L.) using Direct Shoot Regeneration Protocol
Доступна для свободного скачивания:
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.