Уважиемые коллеги, подскажите. Может кто-нибудь сталкивался с такой проблемой.
Для приготовления сред мы всегда использовали обычный пищевой агар протностью 900 г/см3 в концентраци 8 г/л. Среда - cтандартная MS. Среды всегда сразу (после растворения агра) разливали по колбочкам и автоклавировали. Проблем с застыванием не было никогда. Но последняя партия не хочет застывать ни в какую. То есть иногда застывает, а иногда нет и не во всех колбах. Короче, как Бог на душу положит. Тот же пищевой агар, та же плотность. Марка только другая. Мы уже на фирме сертификат запросили с физико-химическими характеристиками. Сравнили с пердыдущим - никакой разницы нету. Может есть еще какие-то свойства агара, которые я не учла. Но с такой проблеммой сталкиваюсь впервые, хотя культурой in vitro растений работаю уже восемь лет.

ну он еще на рН реагирует, но это вы я думаю и сами знаете. и у нас так было, когда автоклав дурил. то есть штативы стоявшие в глубине не застывали... с продувкой кажется что-то было, какая-то трубка засорилась, но я не технарь... =) пришли мужики и все нам починили...

Согласен. Проверьте pH и условия автоклавирования.

скажите а есть у вас прописи каке-нить как делать среды для конкретных растений?

а какой фирмы агар вы использовали? я вот сейчас вычитал, что для подобных манипуляций рекомендуют использовать агар с плотностью не менее 1000 г/см2...

Нихреновая че то плотность у ваших агаров 900 Г/СМ3 1000 Г/СМ2, это я так к слову

Может увеличить концентрацию агара: не один ли фиг 8 ил 15 г/л

pH среды положено вобще то доводить при приготовлении

Хреновый агар! Среда застывает при 9 гр на литр любой среды не успеваеш разливать в пробирки и колбы приходится подогревать, чтобы разлить перед автоклавированием! рН не причём он доводится при приготовлении, автоклавирование также не при делах.
При хреновом автоклавировании среда застывает но при выдержке 3-5 дней заростает грибной и бактериальной инфекцией!!!

Хреновый агар! Среда застывает при 9 гр на литр любой среды не успеваеш разливать в пробирки и колбы приходится подогревать, чтобы разлить перед автоклавированием! рН не причём он доводится при приготовлении, автоклавирование также не при делах.
При хреновом автоклавировании среда застывает но при выдержке 3-5 дней заростает грибной и бактериальной инфекцией!!!

подскажите пожалуйста, кто знает о способах микроклонального размножения дуба, семейства буковых ... желательно очень подробно ... нужно ОООчень

нифига се, для растений обычно рекомендуют 7 г/л агара, а с застыванием у меня была такая фигня, когда плохо перемешивали. по поваду дуба думаю подойт среда для древесных woodi хотя мы на декоративных пробывали, мне больше ms понравилась

По поводу агара добавлю, что не любит он слишком жесткого или повторного автоклавирования.

В итоге оказался фиговый агар. Автоклавирование и pH ни при чем. Купили новый тип агара и все пошло как по маслу. Так что пишевой агар тип D9 не берите (ежели кто пищевым агаром пользуется)

Организовал дома микроклональную лабораторию, сам агроэколог, начинаю практически с нуля, хотя уже в планах переписка дисера на эту тему. Специализация - декоративные, хочу попытаться хвойные. В нашей глуши маловато источников знаний, пока общаюсь с биотехнологами из ВНИИСПК, но у них только вишня и земляника. Если не жалко, коллеги, кто чем может на мыло valeron@orel.ru, любые методички, технологии, учебники, буду исключительно признателен.

по поводу хвойных http://www-sbras.nsc.ru/ws/cfgrs2009/tezisy_1/2/18.htm
первый автор работает в инстите леса им. Сукачева СО РАН. Большой специалист в этом деле. Найдете ее работы, найдете и методики.

9 г/л это дофига. Это мы для рН 4,0 такую делаем! Для среды для растений достаточно 7 г/л...
неисправный автоклав может загнать давление и температуру так, что никакой агар не выдержит и уже никогда не застынет. Так что поверка монометров и тех.обслуживание оборудования - вещь важная.
И вообще если, что-то не получается надо проверить все возможные источники появления косяков...

Агар застывает до автоклавирования, но после него как вода. Хотя питательный агар (МПА) у нас застыл, но остальные среды ни в какую застывать не хотят!!!!

Прошу помощи!!! У кого-нибудь можно перекупить хоть полграмма 6-БАП? ДиаМ 5 месяцев динамят, сволочи, никакой веры в людей не осталось, всё стоит, ничего без БАПа сделать не могу.

народ, кто-нибудь занимается еще введением кустарников в культуру почками???? какие стерилизаторы от грибов и бактерий используете и в какой концентрации??? у меня или заростает всякой заразой много или почки дохнут =(((

Подскажите, пожалуйста, где в сети можно найти подробную информацию о методике микроклонального размножения растений. Больше интересует картофель, но можно вообще любые методики с подробным описанием. Русский и английский язык.

Чем Вас не устраивают 10000 ссылок в гугле?

Тем, что я не знаю, каким можно доверять, а каким нет.

OK, я тоже не знаю. Ждем специалистов.