Äîïîëíåíèå íå â òåìó, à êàê èëëþñòðàöèÿ ïðåäëîæåíèÿ. Ìîæåò áûòü, ñòîèò îðãàíèçîâàòü íà Âàøåì ñàéòå ðàçäåë ïðî ðàçíûå ôåðìåíòû. Äóìàþ, ìíîãèå ñîãëàñÿòñÿ, ÷òî â êàòàëîãàõ ÷àñòî óêàçûâàþò íå âñå èëì íå ñîâñåì êàê åñòü, ïîýòîìó ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì íåêîòîðûå êà÷åñòâà ôåðìåíòîâ ïðèõîäèòñÿ ïðîâåðÿòü. Èíîãäà âñÿêèå ïðèêîëû âûÿñíÿþòñÿ. Òàêèå ìåëî÷è íå îïóáëèêóåøü, çàòî êîìó-òî ìîæåò ïðèãîäèòñÿ, íà òå æå ãðàáëè íå íàñòóïÿò.
Âîçèëñÿ íà äíÿõ ñ Uracil DNA Glycosylase (UDG). Ýòîò ôåðìåíò âûðåçàåò óðèäèíû èç ÄÍÊ, îáðàçóÿ abasic ñàéòû, êîòîðûå ðóøàòñÿ ïðè íàãðåâàíèè. Ñíà÷àëà ïðîâåðèë, êàê îíà ùåïèò ïðàéìåð ñ äâóìÿ U â ñåðåäèíå. Ïîëó÷èë âîò òàêóþ êàðòèíêó: ñíà÷àëà èäóò äâóêðàòíûå ðàçâåäåíèÿ UDG (Sigma #U1257) íà÷èíàÿ ñ 0.5u íà äîðîæêó, íà ïîñëåäíåé äîðîæêå èñõîäíûé ïðàéìåð. Íà ðåàêöèþ (10µl) áðàë 5pmol ìå÷åíîãî ïðàéìåðà. Óñëîâèÿ: 37<sup>o</sup>C - 15', 95<sup>o</sup>C - 15'. Âûõîäèò, ÷òî UDG ðàáîòàåò ïðè ñîâñåì íåáîëüøèõ êîíöåíòðàöèÿõ, à åùå, âèäèìî, â ïðàéìåð ïðè ñèíòåçå âñòàâëÿþò ñìåñü U c T, òàê êàê íà âñåõ äîðîæêàõ ÷òî-òî îñòàåòñÿ.
Ïîòîì, äëÿ ðàáîòû ìíå íóæíî áûëî çíàòü, êîãäà íà÷èíàþò âàëèòñÿ abasic ñàéòû, ïîýòîìó ïîñëå îáðàáîòêè UDG ÿ äåðæàë ðåàêöèþ íà 95<sup>o</sup>C îò 1 äî 20 ìèíóò. Òîæå åñòü íà ÷òî ïîñìîòðåòü.
ß ìîãó åùå ÷òî-íèáóäü ïðèñëàòü, óâåðåí, ÷òî ó áîëüøèíñòâà ïîñåòèòåëåé ôîðóìà ïîëíî âñÿêèõ òàêèõ èíòåðåñíûõ ìåëî÷åé â ðàáî÷èõ òåòðàäÿõ.
Ñ óâàæåíèåì,Îëåã