Меченье тотальной РНК


MolBiol.ru > Методы > Complex-hyb > Меченье тотальной РНК

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · ·

Zbio-wiki

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ИСТОРИЯ ЗООМУЗЕЯ

Мечение total RNA с oligo(dT) праймера

Дополнить

Состав растворов, очистка от РНК и гибридизация - как описано в протоколе "Random primer на polyA⁺RNA".

в пробирку:

oligo(dT) primer ( 100µM) - 0.5µl
total RNA - 10µg
H₂O - до 15µl;

70^oC, 3';
0^oC, 2';
добавить:

5x FSB (first strand buffer) - 8µl
0.1M DTT - 4µl
A^-mix, 20x - 1µl
RNase Block - 0.5µl
a[³³P]dATP (10µCi/µl) - 10µl

NT, 1' ( за это время премешать реакцию, сбросить на центрифуге);
добавить SuperScript RT (200u/µl) /BRL/ - 2µl;
42^oC, 1h;
0^oC, определить процент включения по преципитации 10% ТХУ.

Дополнения, комментарии, вопросы

Люди знающие! Здесь недостаёт того, что знаете вы, но не знал или забыл автор. Этой страницей пользуются ваши коллеги. Пожалуйста, поделитесь с ними опытом. Пригодится всё, что поможет в работе.

Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/

-- как прислать био-картинку --

Дата последней модификации: 30/07/13

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ИСТОРИЯ ЗООМУЗЕЯ

· Викимарт - все интернет-магазины в одном месте · Доска объявлений Board.com.ua ·

--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---

--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru · redactor@molbiol.ru · реклама